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    破解細胞生長慢,這幾個關鍵點你注意了嗎?(上)
    點擊次數:221 發布時間:2022-08-05

    在進行細胞實驗的過程中,相信大家都有這樣的經歷:實驗規劃恨不得精細到每小時,甚至連哪天出數據都預估好了。

    But......

    理想很豐滿,現實往往很骨感!

    “隔壁王師兄的細胞都能傳代了,我的這細胞,咋長得這么慢呢?"


    所以今天,我們就來聊聊,細胞生長緩慢(異常情況的慢,一些特殊細胞不在討論范圍內)的可能原因。


    原因很復雜,可以總結為以下幾點,如果小伙伴們有更多觀點,歡迎補充


    細胞可能存在污染


    各類細胞污染

    都有可能導致細胞生長緩慢


    如果培養體系,不小心被細菌、真菌、支原體污染,都會導致細胞因缺乏營養而出現生長緩慢的現象。


    細菌污染發展迅速,一般會出現培養基渾濁、變黃的現象;真菌污染最好辨認,顯微鏡下可見絲狀菌體(有些甚至嚴重到肉眼可見);而支原體污染往往防不勝防,顯微鏡下也很難捕捉到它的身影。支原體污染的典型特征是培養基提前變黃、細胞生長受阻,后期細胞大量死亡等。


    因此,如果細胞生長緩慢,首先要考慮細胞是否存在污染。并做相應的處理。具體處理方法見以下幾篇文章:

    細胞培養中的污染監控與檢測——細菌

    細胞培養中的污染監控與檢測——真菌

    細胞培養中的污染監控與檢測——支原體


    培養體系有瑕疵


    沒有根據細胞特性調整培養體系

    細胞的體外培養,依賴于完全培養基的支持與保護。有些小伙伴拿到一株陌生的細胞,沒有將培養體系研究清楚就開始實驗,由于培養環境的改變,導致細胞一時無法適應,而出現生長受阻甚至停滯的狀態。


    當我們排除了細胞污染的情況后,就要考慮培養體系是否合理了:培養基種類、品牌是否進行過更換?血清類型是否用錯等等,盡可能保證與原培養條件一致,如果要更換,也要循序漸進。


    細胞初始狀態較差


    細胞長得慢

    很可能不是你的鍋

    可能最一開始復蘇的細胞,就被污染/活力不足。因此,建議大家再復蘇一管同種細胞(最好不是同批次凍存的),與現有細胞進行比較,觀察長勢。


    本期內容先暫停到這里,欲知其他原因,且聽下回分解!


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